【產品信息】

【產品簡介】

酪酰胺信號放大（TSA）系統可用于檢測熒光免疫細胞化學（ICC）、免疫組織化學（IHC）中的低豐度靶點，可將信號靈敏度提高100倍。TSA 熒光試劑盒使用辣根過氧化物酶（HRP）直接催化固定化酶周圍的熒光基團共價沉積，形成永久性共價鍵結合。在運用HRP二抗及一抗在微波熱修復條件下脫離掉抗原失活的原理，重復此過程，即可實現同種屬熒光雙標及熒光三標以及多標（注：此過程僅適用于石蠟切片的熒光多標）。

此試劑盒中的熒光探針可單獨或配合使用。超敏型Flare熒光染料的亮度比普通型Flare熒光染料高10倍以上，不再需要增強劑輔助，即可獲得高亮度的熒光標記。

【儲存與運輸】

冰袋（wet ice）運輸；4℃保存，有效期 12 個月。 

【使用方法】

1.脫蠟至水

依次將切片放入二甲苯 Ⅰ 8min→二甲苯 Ⅱ 8min→無水乙醇 Ⅰ 5min→無水乙醇 Ⅱ 5min→95%酒精 5min→85%酒精 5min→蒸餾水洗。

2.抗原修復（必須為抗原熱修復）

組織切片置于盛滿抗原修復緩沖液（PHxx）（貨號：HKI0001/0002/0003/0004）的修復盒中于微波爐內進行抗原修復。中火8min至沸騰后，斷電間隔8min，中低火7min至沸，此過程中應防止緩沖液過度蒸發，切勿干片。（可自行摸索）

3.阻斷內源性過氧化氫酶和血清封閉

切片加上過氧化物酶阻斷劑（貨號：HKI0047），室溫孵育25min，PBS洗滌后，在組化圈內滴加封閉液（貨號：HKI0009R/B/S）均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。

4.加一抗、二抗

在切片上滴加用通用抗體稀釋液（貨號：HKW2083）按一定比例稀釋的一抗，切片平放于濕盒4℃過夜孵育。加二抗：切片稍甩干后在圈內滴加與一抗相應種屬的二抗覆蓋組織，避光室溫孵育50min（也可使用普通二抗，超敏二抗效果更佳）。

5.加TSA信號放大試劑

根據需要標記的熒光顏色加對應的TSA 放大試劑(Flare超敏濃縮型：超敏染料稀釋液=1:400)，孵育3-10min（具體根據預實驗條件確定）。如遇標記效果差的可適當調整熒光試劑稀釋比，正常孵育。

6. 重復抗原修復從步驟2可進行多色標記

7.DAPI復染細胞核

8.抗熒光淬滅劑封片

9.相應熒光通道拍照或掃描

（注：上述1-8步驟之間，除血清封閉后不用清洗外，各步驟之間都需用純水或PBS充分浸洗）

【注意事項】

1. 本產品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. POLY-HRP羊抗兔/鼠通用二抗屬于附贈試劑，不足100T劑量，可根據需要回購。

樣本來源為兔（或小鼠），若出現較高非特異性熒光著色，一抗為兔抗（或鼠抗）時，可采用POLY-HRP羊抗兔鼠通用二抗(貨號：HKI0029）或POLY-HRP羊抗鼠二抗（貨號：HKI0027）。